參照GenBank中已發表的H7亞型禽流感病毒血凝素(HA)基因設計合成了一對預計擴增片段大小約為310bp的引物。利用這對引物,通過對RT-PCR反應體系和反應條件的優化,建立了針對H7亞型禽流感的RT-PCR檢測方法。敏感性試驗和特異性試驗結果表明,該方法敏感性高,最低可檢出100pg的AIV-H7的mRNA,且應用該引物對新城疫病毒(NDV)、傳染性支氣管炎病毒(IBV)及其他亞型的流感病毒(H1、H3、H5、H9)在相同反應條件下未擴增出任何片段,具有較好的特異性。用所建立RT-PCR方法檢測發病雞組織病料及咽、肛拭子,檢測結果與雞胚病毒分離結果相比,陽性符合率高達90.6%。

H7亞型禽流感RT_PCR診斷方法的建立.pdf