近年來，中國家禽中出現了多種攜帶源自H9N2病毒內部基因的新型重配禽流感病毒（AIVs），並多次導致人類感染，這突顯了H9N2內部基因盒在促進跨物種傳播中的關鍵作用。在本研究中，從表現呼吸症狀的雞和侯丹雞中分離出五株H6N1和一株H6N2 AIVs。遺傳分析顯示，這些H6 AIVs的血凝素（HA）基因屬於ST339樣系，並來源於中國家鵝中流行的H6 AIVs，而其神經氨酸酶（NA）基因則分別來源於H9N2或H5N1 AIVs。值得注意的是，這些H6分離株的全部六個內部基因均來源於G57基因型H9N2病毒。體外研究表明，這些H6 AIVs能夠在禽類和哺乳動物細胞中有效複制。H6N2分離株表現出對類禽受體和類人受體的雙重受體結合親和力，而五株H6N1病毒在體外檢測條件下未顯示可檢測的受體結合親和力。逆向遺傳重配體試驗進一步顯示，H6N1的HA本身具有內在的雙重受體結合親和力。此外，這些H6分離株在小鼠中表現出高毒性，並在雞中誘導明顯的呼吸道症狀，同時在鳥類之間有效傳播。總體而言，我們的研究結果表明，攜帶G57 H9N2內部基因組的H6禽流感病毒正在雞群中積極循環，對家禽健康構成重大威脅，凸顯其對公共衛生的潛在風險，並強調了在人類-禽類界面持續監測的必要性。