流感導致呼吸道感染及相關並發症，對全球公共衛生構成重大威脅。然而，在控制流感大流行中，流感病毒的快速且准確檢測仍然具有挑戰性，因為現有的診斷方法是靜態的，無法區分可存活和不可存活的病毒，也無法直接監測病毒複制動力學。在此，我們報告了具有化學發光/熒光雙響應功能的病毒發光報告分子（VLRs），用於H1N1病毒蛋白酶的無創成像和尿液分析。VLR由一個由N-乙酰神經氨酸封閉的雙環二惡烷化學發光骨架信號結構組成，該骨架進一步連接一個腎髒可清除基團（2-羟丙基）-β-環糊精。VLR在H1N1病毒檢測中的檢測下限為2.62 CCID50/mL，比ICA-qPCR和PMA-qPCR檢測分別低10.4倍和529.8倍。在對 H1N1 病毒感染的小鼠進行氣管內給藥後，VLR 能夠高效聚集於肺部，並特異性與神經氨酸酶反應，從而恢複其近紅外化學發光/熒光信號，實現實時成像。利用腎髒清除途徑（約 94% ID），VLR 可通過體外尿液分析實現對 H1N1 病毒感染的遠程檢測及抗病毒療效的監測。因此，本研究強調了在動態監測病毒複制活性方面的重要進展，並將病毒特異性探針轉化為尿液報告物。