背景：流感病毒高度易變，每年在全球範圍內引發嚴重感染，並造成巨大的社會經濟損失。基於核蛋白（NP）——一種保守性最強的病毒抗原——的交叉保護疫苗和通用診斷檢測系統可有效控制感染傳播。然而，NP同樣存在緩慢進化變化，這些突變對其抗原性和免疫原性的影響尚不明確。
方法：我們表達了十種進化距離較遠的、不同亞型流感A病毒的全長重組6xHis標記NPs蛋白，將其在大腸杆菌BL21(DE3)細胞中進行表達，並通過固定化金屬親和層析法純化這些蛋白。所獲抗原通過質譜和血清學方法進行鑒定。納米顆粒（NPs）作為抗原用於對BALB/c小鼠進行三次免疫接種（每14天一次，每只15微克），並以2微克/毫升的濃度用作酶聯免疫吸附試驗（ELISA）中的捕獲蛋白，以研究適應性突變對NPs抗原性和免疫原性的影響。
結果：我們發現，通過免疫不同核蛋白（NP）誘導的小鼠體內抗NP抗體存在顯著的交叉反應性。同時，觀察到NP在體液免疫原性方面的差異，這與進化驅動的NP突變累積現象相符。總體而言，抗體對異源NP的親和力降低，表明抗NP免疫球蛋白的特異性存在差異，這種差異可能由進化決定的免疫原性表位變異性所致，進而導致逃逸突變的出現。
結論：總體而言，我們的結果反映了NP抗原的輕微進化性質，這會影響抗NP抗體的特異性譜，應被視為開發基於NP的交叉保護疫苗和檢測工具的局限性。