人類挑戰研究是流感研究的重要工具，尤其在研發通用流感疫苗的關鍵階段。然而，流感病毒挑戰研究常因缺乏符合現行良好生產規範的病毒株而受阻。這一難題更因不同流感病毒偏好不同生長基質而加劇——單一生產流程無法適用於所有病毒。本研究旨在通過懸浮病毒生產細胞技術，制備適合開發為人用挑戰病毒的重組母株病毒種子。初期采用貼壁Vero細胞的嘗試導致病毒拯救與增殖性能不佳，采用質粒反向遺傳學方法時的病毒拯救效率遠低於使用貼壁293T細胞的情況。HEK-293細胞被廣泛用作慢病毒和腺相關病毒生產的懸浮細胞系。采用質量可控的懸浮病毒生產細胞（HEK-293），我們優化了A/Texas/71/2017（H3N2）流感病毒的拯救與擴增流程，並在符合良好生產規範的條件下制備了主病毒種子。該研究將推動人類挑戰試驗的開展，有助於加速通用流感疫苗的研發進程。