最近在奶牛中出現的高致病性禽流感（HPAI）H5N1（分支2.3.4.4b，基因型B3.13）對農業部門和公共衛生構成了重大挑戰。由於動物處理的限制和已建立的細胞培養模型的可用性有限，對牛感染和傳播的機制研究已被證明是困難的。本文分離並研究了原代牛胚胎成纖維細胞（BeEF），作為研究甲型流感病毒（IAV）感染動力學的模型。我們比較了感染牛高致病性禽流感H5N1和2022年分離的早期2.3.4.4b基因型（B1.1）後BeEF的唾液酸化特征、感染性病毒產生、病毒複制和斑塊形態。這裏提供的數據表明，與α-2,6唾液酸相比，BeEF中α-2,3唾液酸的表達增加，與之前在牛乳腺組織中報道的唾液酸化特征相似。這些數據還顯示，牛源高致病性禽流感H5N1毒株在牛和禽細胞系中的病毒適應性增加，這與之前在牛乳腺組織中的特征一致。此外，BeEF對2022年H1N1pdm09樣IAV毒株完全敏感，同時保持對2009年H1N1ppm09 IAV的抗性，如之前在乳腺細胞中所描述的那樣。這項研究強調了高致病性禽流感H5N1在哺乳動物中持續的人畜共患適應性，以及與選定的2009年人類H1N1大流行譜系毒株共感染的可能性，從而有可能開發出重組毒株。這些數據支持BeEF作為研究牛宿主中IAV感染的補充體外系統的能力。