流感病毒對公共衛生構成重大風險，每年都會導致大量人類疾病和死亡。季節性流感疫苗必須定期更新，由於與流行毒株不匹配，其有效性往往會降低。此外，滅活疫苗不能提供對可能引起大流行的轉移流感病毒的保護。高致病性禽流感H5N1分支2.3.4.4b在世界各地的野生鳥類中流行，自2024年3月以來，在美國（US）引發了一場影響家禽和奶牛的多州疫情。在這項研究中，我們產生了牛源性人流感a/Texas/37/2024 H5N1低致病性版本的NS1缺陷突變體，即LPhTXdNS1，並在針對野生型（WT）a/Texas/37/2002 H5N1的主要疫苗接種方案中驗證了其安全性、免疫原性和保護效力。LPhTXdNS1在體外的衰減通過其在培養細胞中的複制減少和無法控制IFNβ啟動子激活得到證實。在C57BL/6J小鼠中，與WT A/Texas/37/2024 H5N1相比，LPhTXdNS1降低了病毒複制和致病性。值得注意的是，接種LPhTXdNS1的小鼠表現出高免疫原性，在免疫後第3周和第4周達到峰值，從而對隨後的WT A/Texas/37/2024 H5N1致命攻擊提供了強有力的保護。總之，我們證明單劑量接種LPhTXdNS1疫苗是安全的，能夠誘導針對H5N1的保護性免疫反應。安全性和保護性免疫都表明，LPhTXdNS1有望成為一種潛在的解決方案，在疫情發生時滿足對有效疫苗的迫切需求，以治療受感染的動物和人類。