H9N2低致病性禽流感病毒（LPAIV）由于在家禽中的地方性流行、重配能力以及人类感染事件的增加，仍然构成持续的动物源性威胁。本研究对从长春活禽市场（2022年9月至11月）表面健康的家禽中分离出的三株H9N2病毒进行了特征分析，这些病毒表现出前所未有的遗传和表型特征，显示出增强的动物源性风险。系统发育分析显示这些病毒基因组呈复杂镶嵌型，由四条不同谱系的片段组成：HA来源于BJ/94-like谱系（与人类相关）、PB1/NP/NS来源于F98-like谱系、NA来源于FJ/30-C-like支系，PB2/M基因来源于G1-like谱系。贝叶斯分子钟分析估计最近的共同祖先时间为2022年2月，其中HL55和HL56在2022年5月分化，显示出病毒在当地的快速进化。所有分离株均保留了低致病性禽流感病毒的标志性特征（单碱基HA裂解位点，静脉致病性为零）。然而，受体结合分析显示各分离株之间存在关键差异：虽然HL45仅表现出禽源α2-3受体偏好，但HL55和HL56不仅保持对禽源受体的强结合能力，还显示出对人源α2-6受体的可测亲和力——这一双重结合表型与增强的人畜共患病潜力相关。更重要的是，HL55分离株无需预先适应即可成功感染BALB/c小鼠，导致暂时性的上呼吸道复制、中度体重下降（约9.2%）及轻度疾病，但未出现死亡或系统性传播。这些发现表明，这一特定马赛克H9N2谱系的直接哺乳动物感染能力，进一步支持了关于当代H9N2变异株人畜共患病潜力的不断增长的证据体系。已知的哺乳动物适应标记（PB2 A588V、NA梗塞缺失、HA 226位亮氨酸）与已证明的双受体结合能力及固有的哺乳动物感染性相结合，强调了H9N2病毒向增强人畜共患能力加速进化的轨迹。这些发现表明，亟需加强对活禽市场的监测，对新出现变异株进行全面的抗原特性鉴定，并提升生物安全措施，以降低溢出事件和潜在大流行的风险。