目前尚不清楚奶牛公牛是否易感H5N1高致病性禽流感病毒（HPAIV），以及感染是否会通过生殖道和精液排毒。为填补这一知识空白，我们对性成熟的奶牛公牛进行了鼻腔、包皮腔接种，并多次重复鼻腔或包皮腔接种高剂量的HPAIV（从感染奶牛中分离）。接种后最长19天内收集直肠和瘤胃温度数据，以及精液和包皮拭子等各类样本。其中5头公牛被处死并进行全面尸检，每头动物采集超过50份组织样本。研究全程未观察到临床症状。通过逆转录聚合酶链式反应（rRT-PCR）仅在接种部位检测到病毒RNA2至3天；其他样本和组织均呈阴性。对拭子、精液和包皮样本进行的病毒分离检测表明，无论是单独接种还是序贯接种的奶牛均未排出传染性病毒。所有接种牛均发生血清转化，而对照组接种牛则未产生可量化的抗体。这些数据表明，尽管接受高剂量H5N1亚型高致病性禽流感病毒（HPAIV）攻击，奶牛仍表现出极低的易感性且未形成持续感染，同时牛精液并非H5N1 HPAIV传播的潜在风险。