2.3.4.4b H5N1高致病性禽流感病毒在美国奶牛中广泛传播，对牛奶生产和奶牛健康有重大影响。由于迫切需要针对牛高致病性禽流感持续爆发的干预策略，利用经过测试并证明在多种物种中安全的许可处方平台，开发了一种表达2.3.4.4b H5蛋白（禽流感-H5）的杆状病毒载体灭活高致病性猪疫疫苗。在5个月大的小牛身上测试了重组禽流感-H5疫苗的免疫原性。皮下接种疫苗的动物在注射后出现轻微的部位肿胀，没有进一步影响（或妥协）。疫苗在第一次接种后3周通过ELISA诱导了可测量的免疫反应，尽管抗体反应低或无法通过病毒中和（VN）或血凝抑制（HI）试验检测到。第二次接种疫苗后两周和四周，HI和VN试验在所有接种疫苗的动物中一致观察到抗体滴度大于40，这通常被认为是抵抗HPAI病毒攻击的最低保护滴度。观察到VN和HI滴度之间存在很强的相关性（皮尔逊相关系数（r）大于0.8）。由于该疫苗仅含有流感病毒的H5蛋白，所有接种疫苗的动物分别通过商业NP ELISA和N1特异性酶联凝集素测定对核蛋白（NP）和N1神经氨酸酶抗体呈阴性，这证实了该疫苗与DIVA（区分感染者和接种者）监测相容。总之，这项研究表明，灭活杆状病毒载体疫苗Avian Influenza-H5具有免疫原性，并在小牛体内产生推定的保护性抗体水平，尽管未来在哺乳奶牛中评估该疫苗的研究将确定其在乳腺和牛奶中的局部免疫诱导，以及该疫苗是否能提供针对流感诱导的乳腺炎的现场保护。