人类挑战研究是流感研究的重要工具，尤其在研发通用流感疫苗的关键阶段。然而，流感病毒挑战研究常因缺乏符合现行良好生产规范的病毒株而受阻。这一难题更因不同流感病毒偏好不同生长基质而加剧——单一生产流程无法适用于所有病毒。本研究旨在通过悬浮病毒生产细胞技术，制备适合开发为人用挑战病毒的重组母株病毒种子。初期采用贴壁Vero细胞的尝试导致病毒拯救与增殖性能不佳，采用质粒反向遗传学方法时的病毒拯救效率远低于使用贴壁293T细胞的情况。HEK-293细胞被广泛用作慢病毒和腺相关病毒生产的悬浮细胞系。采用质量可控的悬浮病毒生产细胞（HEK-293），我们优化了A/Texas/71/2017（H3N2）流感病毒的拯救与扩增流程，并在符合良好生产规范的条件下制备了主病毒种子。该研究将推动人类挑战试验的开展，有助于加速通用流感疫苗的研发进程。