流感病毒RNA在RNA抽提试剂裂解缓冲液中的稳定性

目的 评价RNA抽提试剂的裂解缓冲液(lysis buffer,LB)对流感病毒(influenza virus,Flu-V)RNA的稳定作用。方法 将流感病毒临床分离株A/Zhongshan/085/2009(H1N1)进行10-2稀释,加入RNA抽提试剂的LB后,分别置4和-20℃保存7、15、30和45 d,以未经LB处理的Flu-V稀释物作为对照。提取各样品核酸后,分别采用实时RT-PCR(靶序列长105 bp)和普通RT-PCR(扩增子长527 bp)进行检测。结果 经LB处理的样品,在4和-20℃保存45 d,均能检测到特异性扩增信号;在4℃保存30 d,-20℃保存45 d,均可用于较长核酸片段的扩增分析。而未经LB处理的样品,在-20℃也可稳定45 d,用于该两种RT-PCR的检测,但在4℃仅7 d时能检测到527 bp的靶序列,30 d时,两种RT-PCR方法均未检测到靶序列。结论LB可延缓流感病毒RNA的降解,具有用作流感病毒核酸检测样品稳定剂的潜能。 

流感病毒RNA在RNA抽提试剂裂解缓冲液中的稳定性_朱远峰.pdf