甲型流感病毒M2基因真核表達載體的構建及序列分析.pdf目的 構建含有甲型流感病毒M2基因的真核表達載體並分析插入的M2基因序列。方法從接種人流感病毒株A／PR／8／34（H1N1）的雞胚尿囊液中提取病毒RNA，用特異引物進行RT-PCR，擴增M2基因。通過分子克隆技術將所擴增片段克隆入真核表達質粒載體pcDNA3．1（＋）。經雙酶切、PCR鑒定後挑選陽性克隆測序鑒定並對插入的M2基因序列進行分析。結果經雙酶切、PCR及測序鑒定證實M2基因的真核表達載體構建成功。序列分析有4個氨基酸出現變異，提交Genbank進行Blast比對顯示同源性97％（Genbank／NCBI AY768951）。結論M2四聚體蛋白具有H^＋通道功能，能夠協助病毒與宿主細胞膜融合後釋放RNP複合體，還能穩定HA蛋白的結構。M2蛋白的高度保守性和具有交叉保護能力特性使之成為新型的通用流感疫苗的突破口。該結果將為甲型流感病毒基因工程疫苗，通用疫苗和核酸疫苗的研究打下基礎。