多重RT-PCR快速檢測鑒別H7亞型禽流感病毒方法的建立

目的參考AIVM基因和HA基因序列,設計了兩對引物。其中XZ145—2和XZ146爲通用引物,可以檢測所有亞型AIV,跨幅244bp;XZH7—1和XZ147—2爲H7亞型特異性引物,跨幅634bp。利用這兩對引物,通過對多重RT-PCR擴增條件的優化,成功建立了快速檢測鑒別H7亞型AIV的多重RT-PCR技術。特異性和敏感性試驗結果表明,該技術對H7亞型AIV同時擴增出兩條大小分別爲244bp和634bp的cDNA片段,對其他亞型AIV只擴增出244bp的cDNA片段.對其他常見禽病病原無特異性擴增,結果爲陰性;該多重RT-PCR對AIVRNA的最低檢出量爲1pg,對H7亞型AIV RNA的最低檢出量爲10pg。
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