TaqMan熒光定量RT-PCR快速檢測甲3型流感病毒

目的 建立一種特異、靈敏、快速的熒光定量RT-PCR方法用于檢測甲3型流感病毒核酸。方法 根據GenBank登錄的流感毒株序列,應用生物學軟件進行序列比對,在甲3型流感病毒血凝素(HA)基因的保守區設計引物和TaqMan探針、並進行篩選。對熒光RT-PCR反應條件進行優化,檢測該方法的特異性和靈敏度。並對疑似流感含漱液標本進行檢測。結果 該方法對甲3型流感病毒的檢測有高度的特異性,對甲1型、乙型、禽流感病毒。H5、SARS病毒及其他呼吸道病毒均無交叉反應,檢測的靈敏度達0.01TCID50可從疑似流感患者含漱液中直接檢測流感病毒核酸,從病毒核酸提取至完成檢測僅需3h左右。結論 本研究建立的TaqMan熒光定量RT-PCR是一種快速檢測甲3型流感病毒特異、敏感的新方法。
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