A型流感病毒核蛋白噬菌體單鏈抗體的原核表達

目的 從構建的A型流感病毒核蛋白(Nucleoprotein)噬菌體單鏈抗體庫中篩選陽性克隆,在大腸杆菌HB2151中表達流感病毒核蛋白噬菌體單鏈抗體,爲研制A型流感病毒免疫滲漏試劑盒建立基礎。方法 經過連續三輪固相“親和-洗脫-富集”篩選,豐富噬菌體抗體庫中陽性克隆的比例,采用ELISA和SDS-PAGE方法對大腸杆菌培養上清液和細菌周質腔蛋白進行分析目的産物。結果 隨著淘洗輪數的增加,NP抗原特異性的噬菌體抗體得到了高度富集,每輪淘洗可以增加10倍左右的特異性的噬菌體抗體;從96個克隆中篩選到10個陽性克隆,其中三個陽性信號較強,分別爲A1、E1和G3。其OD450mm分別達到0.469、0.582和0.507。結論 利用噬菌體抗體庫技術,初步在大腸杆菌中表達了A型流感病毒噬體單鏈抗體。
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