大熊貓犬冠狀病毒的分離與鑒定

以犬腎傳代細胞(MDCK)從1只病死大熊貓肝髒中分離到1株病毒,命名爲DXMV。電鏡觀察磷鎢酸負染的病毒細胞培養物,發現冠狀病毒樣粒子,超薄切片上可見細胞漿內病毒包涵體。理化學和生物學鑒定結果表明,DXMV核酸類型爲RNA,對氯仿、乙醚敏感,可耐受1%胰蛋白酶的作用,具有一定的耐酸性和耐熱性,可在MDCK、FCWF、F81細胞中增殖,無血凝性和血吸附特性。血清中和試驗結果表明,DXMV可被犬冠狀病毒陽性血清中和。采用犬冠狀病毒間接熒光抗體法染色DXMV細胞飛片,可在細胞漿內見到特異性熒光。以冠狀病毒通用引物和犬冠狀病毒特異性引物,可從大熊貓肝髒和不同代次的病毒細胞培養物中擴增出與預期值251bp和515bp大小相同的核苷酸片段。由此說明,該病毒爲犬冠狀病毒,大熊貓可被犬冠狀病毒感染。
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