H9N2禽流感病毒（AIVs）廣泛存在於家禽中，因其高重組潛力和跨物種傳播能力持續受到關注。2019年3月，中國山東省分別從一頭豬和一只雞中分離出兩株H9N2病毒。本研究對這兩株病毒的全基因組特征、系統發育關系、分子特性及小鼠致病性進行了分析。全基因組序列分析顯示，兩株分離株的8個基因片段核苷酸序列一致性達99.9%～100%。系統發育分析表明，兩株病毒具有相同的重組基因組構成，其中血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）基因與Y280譜系相關，聚合酶基本蛋白2（PB2）和基質蛋白（M）基因與G1譜系相關，聚合酶基本蛋白1（PB1）、聚合酶酸性蛋白（PA）、核蛋白（NP）和非結構蛋白（NS）基因則與SH/F98譜系相關。根據曆史H9N2基因型命名法，這兩種病毒均被歸類為G57型，並與中國江蘇省環境樣本中先前檢測到的H9N2病毒存在密切遺傳關聯。兩株分離株中均檢測到若幹氨基酸替換，這些替換此前與哺乳動物適應性、受體結合、病毒複制及抗原變異相關；但本研究未對其生物學效應進行實驗評估。在小鼠體內，兩種病毒均在肺部和鼻甲處複制並引發間質性肺炎，但均未導致顯著體重減輕或死亡，且在肝髒、脾髒、腎髒或大腦中均未檢出病毒。總體而言，從豬和雞中分離的兩株H9N2病毒展現出高度相似的全基因組特征，並共享多個此前與哺乳動物適應性相關的分子特征。然而，鑒於分離物數量有限，缺乏直接的流行病學和傳播證據，本研究沒有提供足夠的證據來確定家禽對豬的直接傳播、傳播方向或持續的跨物種傳播。