最近，H9N2禽流感病毒（AIV）對禽類產業和公共衛生構成了重大威脅。因此，研究其神經氨酸酶突變對神經氨酸酶抑制劑（NAIs）敏感性的影響，對於臨床上防止H9N2潛在跨物種傳播具有重要意義。在本研究中，我們的結果顯示，1998年至2024年間從中國分離的大多數H9N2病毒的NAI耐藥相關突變主要發生在N70S、E119A/D/G/V、Q133K、Q136A、D151E、Y155H、I222V、R224K、E276D、R292K、N294S和R371K位點。其中，N70S與Y155H聯合突變是近年來流行的H9N2病毒的常見特征。體內實驗表明，攜帶N70S與Y155H聯合突變的這些H9N2病毒在未經適應的情況下，對BALB/c小鼠呈現高致病性。體外神經氨酸酶抑制試驗證實，這些攜帶N70S/Y155H突變的H9N2病毒對奧司他韋和紮那米韋的抑制作用降低程度高於僅攜帶N70S或Y155H單一突變的病毒，但仍對帕拉米韋高度敏感。值得注意的是，神經氨酸酶抑制劑對攜帶N70S和Y155H複合突變的H9N2病毒的體內保護作用有限，這可能歸因於這些藥物在改善過度炎症反應方面的能力受限。因此，亟需加強對攜帶這些突變的H9N2禽流感的流行病學監測和防控策略研究。