自2020年以來，2.3.4.4b亞系H5高致病性禽流感病毒引發了前所未有的全球大流行。我們此前報道過，自2020年出現以來，2.3.4.4b亞系H5N1病毒迅速形成了16種不同的基因型，其中四種在2022年3月前已在中國的野生鳥類和家禽中被檢測到。為了監測這些病毒的傳播與進化，我們於2022年4月至2024年7月期間從中國的野生鳥類棲息地、家禽養殖場和家禽屠宰場采集了60,286份樣本，並分離出30株2.3.4.4b亞系H5流感病毒（25株H5N1和5株H5N6），其中19株來自野生鳥類樣本，11株來自家養鴨和鵝。詳細分析顯示，這25株H5N1病毒和5株H5N6病毒分別形成了7種和3種基因型，其中只有2種H5N1病毒基因型曾被檢測到，其餘基因型均在本研究中首次發現。這些H5病毒在小鼠中表現出不同的致病性，從非致死到高度致死不等，但在抗原性上，它們與目前在中國使用的H5-Re14疫苗株均匹配良好。我們的研究結果表明，2.3.4.4b亞系的H5病毒仍在野生鳥類群體中地方性流行，並且會反複溢出至家禽水禽。因此，對2.3.4.4b亞系H5病毒的進化動態進行持續監測，對於制定循證的預防和控制策略至關重要。