2.3.4.4b H5N1高致病性禽流感病毒在美國奶牛中廣泛傳播，對牛奶生產和奶牛健康有重大影響。由於迫切需要針對牛高致病性禽流感持續爆發的幹預策略，利用經過測試並證明在多種物種中安全的許可處方平台，開發了一種表達2.3.4.4b H5蛋白（禽流感-H5）的杆狀病毒載體滅活高致病性豬疫疫苗。在5個月大的小牛身上測試了重組禽流感-H5疫苗的免疫原性。皮下接種疫苗的動物在注射後出現輕微的部位腫脹，沒有進一步影響（或妥協）。疫苗在第一次接種後3周通過ELISA誘導了可測量的免疫反應，盡管抗體反應低或無法通過病毒中和（VN）或血凝抑制（HI）試驗檢測到。第二次接種疫苗後兩周和四周，HI和VN試驗在所有接種疫苗的動物中一致觀察到抗體滴度大於40，這通常被認為是抵抗HPAI病毒攻擊的最低保護滴度。觀察到VN和HI滴度之間存在很強的相關性（皮爾遜相關系數（r）大於0.8）。由於該疫苗僅含有流感病毒的H5蛋白，所有接種疫苗的動物分別通過商業NP ELISA和N1特異性酶聯凝集素測定對核蛋白（NP）和N1神經氨酸酶抗體呈陰性，這證實了該疫苗與DIVA（區分感染者和接種者）監測相容。總之，這項研究表明，滅活杆狀病毒載體疫苗Avian Influenza-H5具有免疫原性，並在小牛體內產生推定的保護性抗體水平，盡管未來在哺乳奶牛中評估該疫苗的研究將確定其在乳腺和牛奶中的局部免疫誘導，以及該疫苗是否能提供針對流感誘導的乳腺炎的現場保護。