H3N8流感病毒經常從養雞場分離出來。然而,對其病毒學特性,分子進化,毒力和溢出到哺乳動物中的風險的綜合表征仍然有限。特別是,很少關注H3N8禽流感病毒在雞中的傳播效率及其溢出風險。在這裏,我們通過多學科方法系統地表征了從無症狀雞獲得的H3N8分離株,包括基因組監測,受體結合分析以及體內致病性和傳播測定。所有菌株均顯示?>?98% 與人類感染菌株的核苷酸同源性。系統發育分析表明,它們的內部基因來源於H9N2,而HA和PB2基因具有高度同源性(bootstrap支持)?>?98%) 新型H3N3病毒。所有分離株均維持禽型受體結合基序(HA-Q226/G228),同時在哺乳動物細胞中表現出雙重α2,3/α2,6-唾液酸結合和強大的複制(MDCK峰值滴度:107.5 TCID)??/mL).ZJ07表現出優異的熱穩定性(HA活性持續存在?>?3 JS13的神經氨酸酶活性比對照組高1.8倍(p?0.05). 在體內,所有菌株均在雞和小鼠中引起亞臨床感染,具有廣泛的組織嗜性,無需適應,可在直接接觸的家禽中有效傳播。引人注目的是,AH12在雞中實現了100%的空氣傳播。這些發現證實了H3N8沉默家禽循環的能力,並確定了有利於跨物種感染的關鍵特征,包括雙受體結合,哺乳動物模型的感染以及與人類菌株的高度遺傳同源性。AH12的空氣傳播性強調了溢出風險的增加,因此需要加強針對禽-人界面毒株的監測和疫苗。