一種檢測H7N9禽流感病毒在小鼠模型中的vRNA,cRNA和mRNA的鏈特異性定量RT-PCR方法

禽流感病毒(AIV)仍然是家禽業和人類健康的持續威脅。在構成公共衛生威脅的AIV亞型中,H7N9 AIV是中國五次人類感染疫情的罪魁禍首。在這裏,建立了一種基於小鼠模型的檢測系統,該系統可以通過使用帶有標簽序列的逆轉錄引物將三種RNA逆轉錄成相應的cDNA模板,然後使用TaqMan定量PCR方法對其進行絕對定量,從而同時定量分析H7N9 AIV病毒基因組RNA(vRNA)、互補RNA(cRNA)和信使RNA(mRNA)的動態變化。該系統專門針對PB2和NA基因,並首次能夠在動物模型內對所有三種病毒RNA物種進行時空分析。我們的研究結果表明,H7N9禽流感病毒表現出特征性的複制動力學,所有三種病毒RNA都顯示出快速增加,然後出現一定程度的下降。該系統為我們進一步了解AIV在小鼠中的複制動力學提供了一個強大的工具。