歐亞類禽流感(EA)H1N1豬流感病毒(SIV)具有引發下一次流感大流行的能力,因為它對人類α-2,6唾液酸(SA)受體的親和力增強。然而,EA H1N1 SIV受體結合偏好轉換的分子機制仍然難以捉摸。在這項研究中,我們利用EA H1N1 SIV在豬腎細胞中進行了全面的全基因組CRISPR/Cas9敲除篩選。敲除γ-穀氨酰羧化酶(GGCX)通過抑制病毒血凝素(HA)的羧化修飾和子代病毒的粘附來減少病毒在體外和體內的複制,最終阻礙EA H1N1 SIV的複制。此外,GGCX被發現是EA H1N1 SIV D225E替代的決定因素,GGCX藥物化的HA 225E羧化修飾有助於EA H1N1 SIV對α-2,6 SA受體的受體結合適應。綜上所述,我們的CRISPR篩選闡明了GGCX在支持EA H1N1 SIV適應與α-2,6 SA受體結合方面的新功能。因此,GGCX成為對抗EA H1N1 SIV感染和傳播的潛在抗病毒靶點。