多重RT-PCR快速检测鉴别H7亚型禽流感病毒方法的建立

目的参考AIVM基因和HA基因序列,设计了两对引物。其中XZ145—2和XZ146为通用引物,可以检测所有亚型AIV,跨幅244bp;XZH7—1和XZ147—2为H7亚型特异性引物,跨幅634bp。利用这两对引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,成功建立了快速检测鉴别H7亚型AIV的多重RT-PCR技术。特异性和敏感性试验结果表明,该技术对H7亚型AIV同时扩增出两条大小分别为244bp和634bp的cDNA片段,对其他亚型AIV只扩增出244bp的cDNA片段.对其他常见禽病病原无特异性扩增,结果为阴性;该多重RT-PCR对AIVRNA的最低检出量为1pg,对H7亚型AIV RNA的最低检出量为10pg。
多重RT-PCR快速检测鉴别H7亚型禽流感病毒方法的建立.pdf