TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测甲3型流感病毒

目的 建立一种特异、灵敏、快速的荧光定量RT-PCR方法用于检测甲3型流感病毒核酸。方法 根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物学软件进行序列比对,在甲3型流感病毒血凝素(HA)基因的保守区设计引物和TaqMan探针、并进行筛选。对荧光RT-PCR反应条件进行优化,检测该方法的特异性和灵敏度。并对疑似流感含漱液标本进行检测。结果 该方法对甲3型流感病毒的检测有高度的特异性,对甲1型、乙型、禽流感病毒。H5、SARS病毒及其他呼吸道病毒均无交叉反应,检测的灵敏度达0.01TCID50可从疑似流感患者含漱液中直接检测流感病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需3h左右。结论 本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR是一种快速检测甲3型流感病毒特异、敏感的新方法。
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