2020年高致病性H5N1禽流感病毒（2.3.4.4b谱系）的爆发标志着甲型流感病毒（IAV）宿主范围的重大扩展，引发了人们对跨物种传播事件和人畜共患溢出的担忧。2.3.4.4b病毒在美国奶牛群中的引入导致广泛流行，并伴随产奶量下降、乳腺炎及乳汁病毒载量升高。值得注意的是，奶牛体内病毒循环已成为哺乳动物适应与传播的新途径，自2024年以来已在美国引发40多例人类病例。由于血凝素（HA）是决定病毒宿主范围和组织嗜性的主要因素，我们研究了携带禽流感病毒2.3.4.4b亚谱系糖蛋白的病毒是否能感染安格斯牛、荷斯坦牛和利木赞牛的乳腺组织。我们使用乳腺组织切片，将表达三种2.3.4.4b病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）的减毒重组病毒接种至组织中。这些病毒早于H5N1在美国牛群中的出现：A/chicken/England/053052/2021（AIV07）、A/chicken/Scotland/054477/2021（AIV09）和A/chicken/England/085598/2022（AIV48）。通过免疫组化检测发现，在接种AIV09和AIV48后，所有三种牛品种的乳头和腺体囊腔切片均检测到病毒核蛋白（NP）抗原，表明这三种受试牛品种的乳腺组织均易感携带H5N1糖蛋白的病毒感染。凝集素染色结果显示，所有供体的乳腺组织均表达α2,3-和α2,6连接的唾液酸，表明这三种牛品种均有潜力支持禽源和哺乳动物适应性流感病毒的感染。这些发现共同表明，肉牛和奶牛品种的乳腺均易受携带禽源H5N1糖蛋白的病毒感染，并提示牛乳腺组织可能为多种流感病毒（IAVs）共同感染同一组织提供环境。这一可能性凸显了进一步研究的必要性，以及将肉牛和奶牛均纳入H5N1监测与风险评估体系的必要性