高致病性禽流感A(H5N1)病毒属2.3.4.4b亚群D1.1基因型，是家禽大规模爆发的主要原因，也持续引发零星、有时严重的人类感染。在这里，我们对一株野生型(WT) H5N1 D1.1分离株（BC-H5N1-WT）及其H275Y神经氨酸酶(NA)变异株（BC-H5N1-H275Y）进行了研究，这两种病毒都在2024年秋季加拿大不列颠哥伦比亚省的农场出现。体外分析中我们考察了其在MDCK细胞中的复制动力学，提取感染后不同天数(p.i.)的上清液，并通过TCID50和qRT-PCR进行滴度测定。通过NA抑制实验确定了神经氨酸酶抑制剂(NAI)的敏感性，而对巴洛沙韦酸(BXA)的敏感性则通过斑点减少实验评估。体外分析评估了MDCK细胞中的复制动力学，感染后不同天收集上清液，并通过TCID50和qRT-PCR测定滴度。神经氨酸酶抑制剂（NAI）的敏感性通过NA抑制实验确定，而巴洛沙韦酸（BXA）的敏感性则通过斑块减少实验评估。体内毒力在感染了每种病毒十倍系列稀释液的BALB/c小鼠中进行评估，以监测体重下降和死亡率。感染第4天，测定肺、脑、鼻、肾、脾和心脏中的病毒滴度。BC-H5N1-WT病毒对测试的四种抗病毒药物都敏感，而BC-H5N1-H275Y对奥司他韦和帕拉米韦表现出耐药，但仍对扎那米韦和BXA敏感。BC-H5N1-WT 在所有测试时间点的病毒复制滴度都明显高于 BC-H5N1-H275Y，而且斑块尺寸也更大。在小鼠体内，BC-H5N1-WT的毒力更强，LD50值为1.78×103PFU，而BC-H5N1-H275Y为8.71×10?PFU，并且在肺和其他器官中产生了更高的病毒滴度。尽管耐药的H5N1 D1.1变体适应性降低，但其在没有病毒选择压力情况下的出现仍强调了持续监测的必要性。